दक्षिण, उत्तर आणि पश्चिम छिद्रांमध्ये फरक. दक्षिणी Vs उत्तर वि पश्चिमी ब्लॉटिंग
महत्त्वाचे फरक - उत्तरेकडील दक्षिणेकडील पश्चिमी कात टाकणे
डीएनए, आरएनए आणि प्रथिनेचे विशिष्ट क्रम शोधणे आण्विक जीवशास्त्र मध्ये अभ्यासाचे प्रकार. जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस ही एक तंत्र आहे जी त्यांच्या आकारानुसार डीएनए, आरएनए आणि प्रथिने वेगळे करते. जेल प्रोफाइल पासून, विशिष्ट डीएनए क्रम, आरएनए क्रम, किंवा प्रथिने स्पेशल तंत्रज्ञानावर शोधली जातात जी लेबलिंग प्रोबसह ब्लॉटिंग आणि हायब्रिडिझेशन म्हणतात. तीन वेगवेगळ्या प्रकारचे वर्गीकरण म्हणजे दक्षिण, उत्तर आणि पश्चिम असे प्रकार आहेत. उत्तर दक्षिणी आणि पश्चिम ब्लॉटिंग यामधील मुख्य फरक नमुन्याच्या प्रकाराशी निगडीत आहे जो एखाद्या नमुनामधून शोधला जातो. दक्षिणी सूक्ष्मदर्शकास एक अशी पद्धत आहे जी डीएनए नमुना पासून विशिष्ट डीएनए क्रम ओळखते. नॉर्दर्न ब्लोटिंग हे एक तंत्र आहे जे आरएनए नमुना पासून विशिष्ट RNA अनुक्रम ओळखते. पश्चिमी ब्लॉटिंग ही अशी पद्धत आहे जी प्रथिनेयुक्त नमुना पासून विशिष्ट प्रथिने शोधते.
अनुक्रमणिका
1. विहंगावलोकन आणि महत्त्वाचे अंतर
2 दक्षिणी ब्लोटिंग काय आहे 3 नॉर्दर्न ब्लॉटिंग 4 काय आहे वेस्टर्न ब्लॉटिंग 5 साइड कॉसमिस बाय साइड - नॉर्दर्न वि दक्षिण vs वेस्टर्न ब्लोटिंग
6 सारांश
सक्षमीकरण म्हणजे काय?
डीएनए नमुना पासून विशिष्ट डीएनए क्रम ओळखण्याकरिता 1 9 75 मध्ये ई. एम. सदर्नने दक्षिणी सूक्ष्म तंत्र विकसित केले. या आण्विक जीवशास्त्र मध्ये ओळखण्यात प्रथम blotting तंत्र आहे हे डीएनए, विशिष्ट तुकड्यांना डीएनए, इत्यादीमधून विशिष्ट जीन्सचा शोध सक्षम करते. दक्षिणेतील छेडछाड तंत्रात अनेक पावले उचले आहेत. ते असे आहेत
डीएनए नमुना पासून वेगळ्या आहे आणि प्रतिबंध endonucleases सह पचले.
पेस्ट केलेले नमुने Agarose jel electrophoresis द्वारे विभक्त केले आहेत.
जेलमधील डीएनए तुकड्यांना अल्कधर्मी द्रावण वापरुन एकल जातींमध्ये विकृत केले जातात.- केशिका हस्तांतरण करून एकल फंक्शयुक्त डीएनए नायट्रोसेल्यूलोज फिल्टर पडद्यावर हस्तांतरित केला जातो.
- स्थलांतरित डीएनए पडदा वर कायमस्वरूपी निश्चित केला जातो.
- पडदावरील मुदत डीएनए लेबल शोधांसह हायब्रिडिज्ड केले जाते.
- पाण्यावरून वॉशिंगद्वारे अनबाउंड डीएनए धुऊन जाते.
- एक्स-रे फिल्म पडदा उघड आहे आणि एक ऑटोरिडोग्राफ तयार आहे.
- आण्विक जीवशास्त्र या वेगवेगळ्या पैलूंसाठी दक्षिणेकडील सूक्ष्मदर्शकतेचा वापर केला जातो.हे आरएफएलपी मॅपिंग, फोरेन्सिक अभ्यास, डीएनए मेथिलिकेशन इन जीन एक्स्प्रेशन, आनुवंशिक विकारांमधील उत्परिवर्तित जीन्स, डीएनए फिंगरप्रिंटिंग इ. मध्ये उपयुक्त आहे. आकृती 1: दक्षिणी काजळीची पध्दत तंत्र
- उत्तर छेदन काय आहे?
आरएनएला जेलमधून स्लेटिंग झिल्लीवर हस्तांतरित केले जाते आणि फिक्स केले जाते.
पडदा सीडीएनए किंवा आरएनए (तयार केलेले चाचणी विशिष्ट नमुन्याचे पूरक आहे) पासून तयार केलेले लेबल केलेल्या शोधाने हाताळले जाते.
विशिष्ट क्रमाने बाइंड करण्यासाठी पडदा पडताळणीसाठी तपासली जाते.
अनबाउंड शोध धुतले जातात.
- संक्रमित तुकड्यांची ऑटोरिडोग्राफ द्वारे शोधली जाते.
- हायब्रीज केलेल्या एमआरएनएचे शोध आणि प्रमाणीकरण, आरएनए डीग्रेडेशनचा अभ्यास, आरएनए अर्ध्या-जीवनाचे मूल्यांकन, आरएनए स्पिकिंगचा शोध, जीन एक्स्प्रेशनचा अभ्यास, इत्यादि ओळखण्यासाठी उत्तर गोलाकार हे महत्वाचे साधन आहे.
- आकृती 2: नॉर्दर्न ब्लोटिंग
- वेस्टर्न ब्लोटिंग काय आहे?
- वेस्टर्न ब्लॉटिंग हे लेबलिंग एंटीबॉडीच्या वापराद्वारे प्रथिनेयुक्त मिश्रणाने विशिष्ट प्रथिने शोधण्याचा एक मार्ग आहे. म्हणून, पाश्चात्य डाग एक
- इम्यूनोब्लॉट म्हणून ओळखला जातो. हे तंत्रज्ञान 1 9 7 9 मध्ये टोविनिन एट अल द्वारे सुरु करण्यात आले होते आणि आता ती नियमितपणे प्रथिने विश्लेषणासाठी प्रयोगशाळेत केली जाते. खालीलप्रमाणे चरण आहेत
प्रोटिन्सची नमुना
पासून काढली जाते> polyacrylamide gel electrophoresis वापरून प्रथिने त्यांच्या आकाराने विलग केल्या जातात
विभक्त रेणूंना पीव्हीडीएफ झिमेमध्ये किंवा एनट्रोसेल्यूलोज झिले इलॅक्ट्रोप्रोशन द्वारे हस्तांतरित केले जाते
झिंबाबतास अनावश्यक बंधनासाठी अवरोधित केले आहे ऍन्टीबॉडीज हस्तांतरित प्रथिने प्राथमिक प्रतिपिंड (एन्जाइम लेबल एंटीबॉडीज) सह बांधलेली असतात. अस्पष्टपणे बाध्य प्राथमिक एंटीबॉडीज काढण्यासाठी पडदा धुऊन केला जातो बाभुळ प्रतिपिंडांना सब्स्ट्रेट जोडुन आणि रंगीत द्रवपदार्थाचा शोध लावुन शोधले जाते मानवी ब्ल्यूटिंग एचआरसीच्या ऍन्टीबॉडीजला मानव सीरम नमुना. पाश्चात्त्य धब्बा हे हेपटायटीस बी संसर्गाची पुष्टी चाचणी म्हणून आणि पागल गाय रोगासाठी निश्चित चाचणी म्हणून वापरला जाऊ शकतो. आकृती 03: पाश्चात्य सोडुन काढणे
- उत्तर दक्षिणेकडील आणि पश्चिम छोटयादात काय फरक आहे?
- - फरक लेख मध्य पूर्व -> नॉर्दर्न बनाम साउदर्न बनाम वेस्टर्न ब्लोटिंग
- रेणूचा प्रकार तपासला गेला
- नॉर्दर्न ब्लोटिंग नॉर्दर्न ब्लोटिंग आरएनए नमुना पासून विशिष्ट आरएनए क्रम ओळखते.
- दक्षिणी कात टाकणे दक्षिणी सूट डीएनए नमुना पासून विशिष्ट डीएनए क्रम ओळखते.
- पाश्चात्य दावे करणारे पाश्चात्य ब्लॉटिंग प्रोटीन नमुना पासून विशिष्ट प्रथिने ओळखते.
- जेलचा प्रकार
नॉर्दर्न ब्लोटिंग
हे ऍगरोसे / फॉर्मलाडाइहाइड जेल वापरते.
