एसडीएस पेज आणि वेस्टर्न ब्लॉटमध्ये फरक | एसडीएस पृष्ठ वि पश्चिमी ब्लॉट
महत्त्वाचा फरक - एसडीएस पृष्ठ विरुद्ध पश्चिम ब्लॉट
पाश्चात्य ब्लॉटिंग हे एक तंत्र आहे जे प्रथिनेयुक्त नमुना पासून विशिष्ट प्रथिने शोधते. हे तंत्र अनेक प्रमुख पावलांमधून केले जाते: जेल इ विद्युफोशिरिसती, ब्लॉटिंग आणि हायब्रिडिजेशन. सोडियम डाइडसायल सल्फेट पॉलियाकेलामाइड जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस (एसडीएस पेज) ही एक प्रकारची जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस तंत्र आहे ज्याचा उपयोग त्यांच्या आकारानुसार (आण्विक वजन) प्रथिने विभक्त करण्यासाठी केला जातो. पाश्चात्य धूर एसडीएस पृष्ठामधील प्रथिने सारखाच नमुना हस्तांतरित करण्यासाठी वापरल्या जाणार्या सूत कातडयाचा झडपाचा एक विशेष पत्रक आहे. एसडीएस पान आणि वेस्टर्न ब्लोट यातील प्रमुख फरक असा आहे की एसडीएस पृष्ठ मिश्रणातील प्रथिने वेगळे करणे परवानगी देतो तर वेस्टर्न ब्लॉट मिश्रणातून विशिष्ट प्रोटीनची तपासणी आणि मात्रा वाढविण्यास परवानगी देतो. दोन्ही प्रवण विश्लेषण अभ्यासांमध्ये उपयुक्त आहेत. अनुक्रमणिका 1. विहंगावलोकन आणि महत्त्वाचे अंतर
2 एसडीएस पृष्ठ 3 वेस्टर्न ब्लॉट 4 म्हणजे काय साइड तुलना करून - एसडीएस पृष्ठ विरुद्ध पश्चिम ब्लॉट5 सारांश
एसडीएस पृष्ठ म्हणजे काय?
एसडीएस पृष्ठ हे प्रोटीन डिटेक्शनसाठी वापरली जाणारी एक जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस तंत्र आहे. हे सामान्यतः बायोकेमेस्ट्री, जननशास्त्र, फोरेंसिक आणि आण्विक जीवशास्त्र मध्ये वापरले जाते. एकदा प्रथिने नमुने काढल्यावर, ते एसडीएस आणि पॉलीएक्लायमाइडच्या बनलेल्या एका जेलवर चालतात. एसडीएस हे अॅनिऑयनिक डिटर्जंट आहे जे प्रथिने (विकृती प्रथिने) लाईनारिझ करण्यासाठी आणि त्यांच्या आण्विक द्रव्यमानाशी अनुकरणीय रेषीय प्रथिनेला एक नकारात्मक भार देण्यासाठी वापरला जातो. Polyacrylamide जेल साठी घन आधार बनते. नकारार्थी प्रथिने जे नकारार्थी आहेत ते जेलच्या माध्यमातून उपकरणाच्या सकारात्मक अंतरावर स्थलांतर करतात. प्रथिनेच्या आकारानुसार, प्रथिनेमध्ये वेग बदलत असतात आणि वेग वेगळे होतात. म्हणून, एसडीएस पृष्ठ त्यांच्या आकारावर आधारित वैयक्तिक प्रथिने वेगळे करण्याकरता उपयोगी आहे.
एसडीएस पृष्ठामध्ये प्रोटीनच्या विभाजनासाठी polyacrylamide gel तयार करणे हे एक महत्वपूर्ण पाऊल आहे. Polyacrylamide आणि cross-linking एजंटचा वापर योग्य अचूकता जेलच्या भौतिक गुणधर्मांवर जोरदार प्रभाव टाकते, ज्यामुळे विविध प्रथिने वास्तविक वेगळे होतात. प्रभावी पृथक्करणाकरीता जेलचे छिद्र आकार व्यवस्थित व्यवस्थापित केले पाहिजे. तथापि, एसडीएस पृष्ठ उच्च रिझोल्यूशन प्रोटीन वेगळं तंत्र म्हणून मानला जातो.
एसडीएस पृष्ठ तंत्रात प्रथिने विश्लेषण मध्ये मोठी मर्यादा आहे. एसडीएस विभक्त होण्याआधी प्रथिने निरूपयोगी असल्यामुळे ते एन्झामेकेट क्रियाकलाप, प्रोटीन बंधनकारक क्रिया, प्रोटीन कॉफॅक्टर्स इत्यादिंचा शोध घेण्यास परवानगी देत नाही.
आकृती 01: एसडीएस पृष्ठ
वेस्टर्न ब्लॉट म्हणजे काय?पाश्चात्य ब्लोटिंग तंत्राने प्रथिनेयुक्त मिश्रण आणि प्रथिनाचे प्रमाण आणि आण्विक वजन मोजण्याचे विशिष्ट प्रथिने शोधणे शक्य होते. पाश्चात्य धूर एसडीएस- polyacrylamide जेल मध्ये प्रथिने नमुन्यांची मिरर प्रतिमा मिळविण्यासाठी ब्लोटिंग प्रक्रियेदरम्यान वापरली पडदा आहे. पश्चिमी ब्लॉटिंगसाठी वापरली जाणारी झिल्ली मुख्यतः नायट्रोसेल्यूलोज किंवा पॉलीविनाइलीडेन फ्लू्लोराईड (पीव्हीडीएफ) ची बनलेली आहे. इच्छित प्रथिने ओळखण्यासाठी हस्तांतरित प्रथिने असलेल्या पडदाचा वापर केला जाऊ शकतो. हा संकरित करून इच्छित प्रथिने तपासण्यासाठी उच्च गुणवत्तेची ऍन्टीबॉडी आवश्यक आहे. ऍन्टीबॉडी त्याच्या विशिष्ट ऍटिजेनशी बांधून ठेवते आणि प्रथिने असलेले इच्छित प्रतिजन असलेले अस्तित्व प्रकट करते.
एसडीएस पॉलीएक्लीमामाइड जेलपासून पश्चिमी ब्लॉटपर्यंतचे प्रथिने हस्तांतरण इलेक्ट्रोब्लोटिंगद्वारे केली जाते. ही एक प्रभावी आणि वेगवान पद्धत आहे ज्यामुळे प्रथिने जेलमधून बाहेर फेकून बाहेर पडतात आणि नायट्रोसेल्यूलोज पडदा (वेस्टर्न ब्लॉट) वर जातात.आकृती 02: वेस्टर्न ब्लॉट
एसडीएस पृष्ठ आणि वेस्टर्न ब्लॉटमध्ये काय फरक आहे?
- अंतर लेख -> एसडीएस पृष्ठ विरुद्ध पश्चिम ब्लॉट
एसडीएस पेज एक जेल इलेक्ट्रोफोरेसीस तंत्र आहे.
पाश्चात्य दाग हे एक तंत्र आहे जे एखाद्या विशिष्ट प्रोटीनच्या मिश्रणापासून ते ओळखण्यासाठी पडद्यावर केले जाते.
वापरा
