आरटी-पीसीआर आणि QPCR दरम्यान फरक

रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पोलिमरेझ चेन रिऍक्शनचा वापर केल्याप्रमाणे डीएनए आणि आरएनएची मोजमाप करण्याची पद्धत असताना प्रत्यक्षात रिअल टाईम पीसीआर क्यूपीसीआर मधील फरक प्रत्यक्षात पारंपारिक एकांताचा दृष्टिकोन पद्धत बदलला आहे. (आरटी-पीसीआर)

आरटी-पीसीआर वि. QPCR

बायोटेक्नॉलॉजीमधील प्रगतीमुळे वर्षांमध्ये अवयव प्रत्यारोपणाची मागणी पूर्ण करण्यासाठी अनेक मार्ग शोधले गेले आहेत. त्याआधी, एखाद्या व्यक्तीने मृत्यूची लगेच गरज भासल्यास रुग्णाची देणगी देण्यास स्वेच्छेने दान केले असेल तर फक्त प्रत्यारोपणासाठी ऑपरेशन सुरू होऊ शकेल. जीवशास्त्रज्ञांच्या सतत अभ्यास आणि संशोधनामुळे स्टेम पेशींचा शोध लावला जातो.

स्टेम सेल जे गर्भाच्या डीएनए मधून घेतले जातात ते संदर्भ देतात, जे सेलच्या पुनर्जन्मासाठी स्रोत म्हणून काम करतील जे मूलतः डीएनएचे पुनरुत्पादन केले गेले असेल अशा अवयवाचे क्लोन असतील. मानवी हक्क कार्यकर्ते अशा प्रक्रियेच्या स्थगितीसाठी लॉबी करत असताना, यशस्वी ऑपरेशनांनी अंग प्रत्यारोपणातील स्टेम सेल विकासाची प्रभावीता सिद्ध केली आहे.

एखाद्या व्यक्तीला स्टेम सेल्सची जाणीव आहे आणि ते पूर्णपणे समजण्याआधी, तथापि, या वैज्ञानिक शोधशी संबंधित विविध परिभाषांशी परिचित होण्याची आवश्यकता आहे. डीएनए आणि त्याच्या कोडींगशी सेल लागवड व्यवहार करतात. त्यामुळे आरटी-पीसीआर आणि केपीसीआर यांच्यातील फरक दर्शवणार्या विद्यार्थ्यांमध्ये किंवा क्षेत्रातील स्वारस्य असलेल्या कोणत्याही व्यक्तीसाठी हे महत्त्वाचे आहे.

रिवर्स ट्रान्सक्रिप्शन पॉलिमरेझ चेन रिऍक्शन (आरटी-पीसीआर) हे पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन किंवा पीसीआरचे अनेक प्रकार आहेत. शास्त्रज्ञांनी विशिष्ट डीएनए संक्रमणाची एकापेक्षा जास्त प्रतिलिपी तयार करण्याची प्रक्रिया म्हणून "प्रवर्धन" म्हणून या प्रयोगशाळे तंत्राचा व्यापक उपयोग आण्विक जीवशास्त्र मध्ये केला जातो. "आरटी-पीसीआर आणि पारंपारिक पीसीआर यात फरक आहे की आरएनए प्रथम त्याच्या डीएनए पूरक भाषेत लिप्यंतरित आहे, जो रिवर्स ट्रांस्क्रिप्टेझ वापरतो. नवे पूरक डीएनए ज्या उलट नक्कल करेल त्या नंतर पारंपारिक पीसीआर किंवा रिअल-टाइम पीसीआर वापरुन विस्तारित केले जाईल.

या प्रक्रियेचा अभ्यास करणारे बहुतेक विद्यार्थी रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन पीसीआर आणि रिअल-टाइम पीसीआरची देवाणघेवाण करण्याची चूक करतात कारण दोन समान संवृत्त आहेत. संभ्रम टाळण्यासाठी, जीवशास्त्रज्ञ रिअल-टाइम पीसीआरला मात्रात्मक रिअल-टाइम पीसीआर किंवा qPCR म्हणून लेबल करतात.

QPCR आरटी-पीसीआर पासून मोठ्या प्रमाणात वेगळे आहे, कारण qPCR जबाबदार मोजण्यासाठी म्हणून जबाबदार आहे. असे म्हटल्या जाऊ शकते की आरटी-पीसीआर प्रदीप्त करण्याची प्रक्रिया सुरू करते, आणि प्रक्रिया सुरू झाल्याबरोबर qPCR हे त्याचे मापन करते.

संख्यात्मक रिअल टाईम पीसीआर < डीएनए आणि आरएनएचे प्रमाण सांगताना QPCR प्रत्यक्षात पारंपारिक एकांगी दृष्टिकोन पद्धतीमध्ये क्रांतिकारक बनला आहे, म्हणून qPCR पद्धत वापरण्यामुळे जीवशास्त्रज्ञांना न्यूक्लीय एसिडची प्रारंभिक एकाग्रता प्रतिक्रियांचे निष्कर्ष काढले गेले आणि खाली दिल्यानंतरही.

qPCR चा अनुप्रयोग, ज्यास आता अनुवांशिक अभ्यासांकरता सर्वात प्रभावी व संवेदनशील विश्लेषण तंत्र समजले आहे, ने मोठ्या प्रमाणात रूंदी केली आहे.सध्या आरएनए हस्तक्षेप मापनांसह, परिमाणवाचक जीन एक्सप्रेशन विश्लेषण, जीनोटाइपिंग, पॅथोजेन डिटेक्शन आणि एसएनपीचे विश्लेषण यात सहभाग आहे.

QPCR बहुतेक वेळा रिव्हर्स लिप्यंतरण प्रक्रियेच्या सहाय्याने मेसॅनर आरएनए आणि मायक्रोआरएनए यांची तपासणी करण्यासाठी एकत्रित केले जाते आणि त्यांचे परीक्षण व परीक्षण केलेल्या पेशींच्या पेशींमध्ये असतात. हे नंतर दोन दरम्यान एक दुसर्या दृश्य फरक देते: आरटी-पीसीआर प्रवर्धन प्रक्रियेसाठी वापरला जाऊ शकतो, पण प्रमाणाच्या उद्देशाने qPCR सह तो फ्यूज केला जाण्याची आवश्यकता आहे.

पीसीआरच्या प्रगतीचा झपाटय़ वाढ (लॉग) टप्प्यात माहिती गोळा करता येण्याजोगा म्हणून QPCR देखील अधिक मात्रात्मक असल्याचे ज्ञात आहे. जीवशास्त्रज्ञ हे लक्षात घ्या की पीसीआरचे उप-उत्पादनाचे प्रमाण qPCR द्वारे मोजले जाणारे टेम्पलेट न्यूक्लिक एसिडच्या प्रमाणाशी प्रत्यक्ष प्रमाण आहे.

दुसरीकडे, आरटी-पीसीआर प्रमाणित स्वरूपापासून दूर आहे कारण एखाद्या एकाग्रतेच्या निर्धारित मानकानंतर जेल वर प्रॉप्लिड बँडची तीव्रतेचा विचार केल्यास "अर्ध-परिमाणित" निष्कर्ष येऊ शकतात.

सारांश:

1 QPCR आणि RT-PCR दोन्ही संज्ञा जैव तंत्रज्ञान आणि डीएनएच्या एकापेक्षा जास्त प्रतींच्या निर्मितीसाठी वापरल्या जातात.

2 आरटी-पीसीआरचा वापर डीएनए कोडच्या उलट लिप्यंतरणीसाठी केला जातो; QPCR amplification उपाय.

3 आरटी-पीसीआर एम्प्लीफिकेशनसाठी आहे, तर qPCR मात्रात्मकतेसाठी आहे

4 QPCR निसर्गात परिमाणवाचक आहे, तर RT-PCR नाही. <